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什麽是色譜法

色譜法(chromatography)又稱“色譜分析”、“色譜分析法”、“層析法”,是壹種分離和分析方法,在分析化學、有機化學、生物化學等領域有著非常廣泛的應用。

色譜法利用不同物質在不同相態的選擇性分配,以流動相對固定相中的混合物進行洗脫,混合物中不同的物質會以不同的速度沿固定相移動,最終達到分離的效果。

壹、色譜

色譜又稱色層法或層析法,是壹種物理化學分析方法,它利用不同溶質(樣品)與固定相和流動相之間的作用力(分配、吸附、離子交換等)的差別,當兩相做相對移動時,各溶質在兩相間進行多次平衡,使各溶質達到相互分離。

1906年Tswett 研究植物色素分離時提出色譜法概念;他在研究植物葉的色素成分時,將植物葉子的萃取物倒入填有碳酸鈣的直立玻璃管內,然後加入石油醚使其自由流下,結果色素中各組分互相分離形成各種不同顏色的譜帶。按光譜的命名方式,這種方法因此得名為色譜法。以後此法逐漸應用於無色物質的分離,“色譜”二字雖已失去原來的含義,但仍被人們沿用至今。

在色譜法中,靜止不動的壹相(固體或液體)稱為固定相(stationary phase) ;運動的壹相(壹般是氣體或液體)稱為流動相(mobile phase)。

二、分類

1、柱色譜

為向玻璃管中填入固定相,以流動相溶劑浸潤後在上方倒入待分離的溶液,再滴加流動相,因為待分離物質對固定相的吸附力不同,吸附力大的固著不動或移動緩慢,吸附力小的被流動相溶劑洗下來隨流動相向下流動,從而實現分離。

2、紙色譜

以濾紙條為固定相,在紙條上點上待分離的混合溶液的樣點,將紙條下端浸入流動相溶劑中懸掛,溶劑因為毛細作用沿濾紙條上升,樣點中的溶質從而被分離。

3、薄層色譜

是在玻璃板上塗以固定相塗層,然後點樣,下端浸入溶劑,同樣自下而上分離。常用於探索柱色譜實驗條件,溶劑和固定相的選擇等。

常用固定相有石膏、氧化鋁、蔗糖、澱粉等,常用流動相為水、苯等各種有機溶劑。