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低產Ampc酶有何臨床意義

AmpCβ內酰胺酶(簡稱AmpC酶)是由腸桿菌科細菌或(和)綠膿假單胞菌的染色體或質粒介導產生的壹類β內酰胺酶,屬β內酰胺酶Ambler分子結構分類法中的C類和Bush-Jacoby-Medeiros功能分類法中第壹群,即作用於頭孢菌素且不被克拉維酸所抑制的β內酰胺酶。故AmpC酶又稱作為頭孢菌素酶。

1 AmpC酶的分類

AmpC酶按其產生的方式3類:誘導高產酶、持續高產酶和持續低產酶。

1.1 誘導高產酶 AmpC酶的合成往往與β-內酰胺類抗生素的存在有關。絕大部分腸桿菌科細菌和綠膿假單胞菌在正常條件下(即無β內酰胺類抗生素存在的條件下)只產生少量的AmpC酶。而當有誘導作用的β內酰胺類抗生素存在的條件下,AmpC酶的產量明顯增加,增加的範圍在100~1000倍之間。

1.2 持續高產酶 另有壹部分產AmpC酶的菌株不論在有無β內酰胺類抗生素存在的條件下均可持續高水平產生AmpC酶,其原因為去阻遏突變,即調控基因之壹的ampD基因發生突變,產生的有缺陷的AmpD蛋白,而不能與另調控蛋白-AmpR蛋白結合形成復合物,AmpR蛋白即以激活子狀態發揮激活作用,引起AmpC酶的大量表達。質粒介導的AmpC酶往往都屬於此類AmpC酶。產生種AmpC酶的細菌對臨床的危害最大,是臨床微生物實驗室檢測的重點。

1.3 持續低產酶 還有極少部分產AmpC酶的菌株,不論在有無β內酰胺類抗生素的存在的條件下均持續低水平的產生AmpC酶,其原因可能是另壹種調節基因-ampR基因發生突變,產生有缺陷的AmpR蛋白,不能在無β內酰胺類抗生素存在的條件下起到抑制子的作用,也不能在有β內酰胺類抗生素存在的條件下起到激活子的作用,故AmpC酶得以持續低水平地表達。

2 AmpCβ內酰胺酶的檢測方法

檢測不同類型的AmpC酶或檢測產不同類型AmpC酶的菌株,其方法也有所不同。已陸續報道了多種檢測AmpC酶的方法,除改良的三維試驗較為經典外,其他的檢測方法還不成熟,尚在摸索,試驗階段,檢測的結果也各不相同。現講述如下。

2.1 頭孢西丁敏感試驗AmpC酶可以水解頭孢西丁(FOX),即產AmpC酶的菌株對頭孢西丁耐藥。而超廣譜β內酰胺酶(ESBLs)等其他β內酰胺酶壹般不能分解頭孢西丁,即產ESBLs的菌株對頭孢西丁敏感。利用AmpC酶的這壹特性,可以對產AmpC酶的菌株進行初步篩選。

具體操作方法:(1)紙片擴散法:按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)的紙片擴散(K-B)法進行。FOX紙片的含量為30μg。判斷標準為抑菌環<18mm,表示待檢菌株對FOX耐藥。(2)稀釋法:手工的(微量)肉湯稀釋方法參照NCCLS的方法進行;也可用MicroScan等微生物分析儀進行分析,操作方法按其操作規程進行。判斷標準為MIC>16μg/ml表示待檢菌株對FOX耐藥。對FOX耐藥的菌株,應懷疑產AmpC酶可能。但是Coudron等利用該標準檢測肺炎克雷伯菌,大腸埃希菌和奇異變形桿菌AmpC酶時發現28株頭孢西丁抑菌環<18mm的肺炎克雷伯菌中,只有4株產AmpC酶,有2株產AmpC酶的大腸埃希菌的抑菌環分別為17mm和18mm。故此方法僅僅作為初步篩選。需做三維試驗或紙片協同試驗等試驗,進行進壹步的確定。