當壹束平行的單色光通過含有均勻的吸光物質的吸收池（或氣體、固體）時，光的壹部分被溶液吸收，壹部分透過溶液，壹部分被吸收池表面反射；
設：入射光強度為 I0，吸收光強度為Ia，透過光強度為It，反射光強度為Ir，則它們之間的關系應為：
I0 = Ia + It + Ir (4)
若 吸收池的質量和厚度都相同，則 Ir 基本不變，在具體測定操作時 Ir 的影響可互相抵消（與吸光物質的 c及 b 無關）
上式可簡化為： I0 = Ia + It (5)
實驗證明：當壹束強度為 I0 的單色光通過濃度為 c、液層厚度為 b 的溶液時，壹部分光被溶液中的吸光物質吸收後透過光的強度為 It ，則 它們之間的關系為：
稱為透光率，用 T % 表示。
稱為 吸光度，用 A 表示
則 A = -lgT = K · b ·c
此即 Lambert-Beer 定律 數學表達式。