Flag標簽系統是已被公認的用於表達、純化以及檢測融合蛋白的表達系統,廣泛應用於Western blotting、免疫細胞組化、免疫***沈澱、流式細胞術、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個研究領域。Flag標簽是壹個與重組蛋白相融合的由8個親水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)組成的多肽片斷。FLAG標簽只有8個氨基酸組成,因此它不會占據其他表位與結合域,避免導致融合蛋白的功能、分泌性以及轉運發生改變。由於它的親水性特點,FLAG標簽傾向於定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結合以及被腸激酶酶解。
由於Flag標簽可位於蛋白質的C端或N端,這壹系統已用於各種細胞類型,包括細菌、酵母和哺乳細胞。由於Flag標簽系統的純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody 可以用於檢測和Flag標簽融合表達蛋白的表達、細胞內定位,以及純化、定性或定量檢測Flag融合表達蛋白等。比如在免疫熒光IF的實驗裏,同時配合EarthOx的Dylight 549熒光二抗,使用該抗體可以準確的定位出Flag融合表達蛋白在細胞內的位置(如圖紅色顯示部分)。另外,做融合表達分析前,通過免疫***沈澱技術獲得Flag融合表達蛋白也是非常重要的壹步,因此選擇壹個合適的、可用於免疫***沈澱(Immunoprecipitation,IP)Flag標簽抗體也是很必要的。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody不僅能應用於細胞內定位的IF實驗,同樣還能應用於IP實驗。1:200甚至更高的IP實驗稀釋比率,也說明了該抗體本身的具有很高的效價,同時,因為是單克隆抗體,因此特異性也很高。高效價所對應的高稀釋比率也意味著超高性價比。