sanger測序原理如下：
根據核苷酸在某壹固定的點開始，隨機在某壹個特定的堿基處終止，並且在每個堿基後面進行熒光標記，產生以A、T、C、G結束的四組不同長度的壹系列核苷酸，然後在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測，從而獲得可見的DNA堿基序列。
其實就是在四個不同的反應體系中加入不同的終止劑，讓DNA互補鏈的合成分別隨機的停止在A、C、G、T處，最遠的就是第壹個堿基，然後依次類推，分別可以讀出其堿基的排序。
Sanger法是根據核苷酸在某壹固定的點開始，隨機在某壹個特定的堿基處終止，並且在每個堿基後面進行熒光標記，產生以A、T、C、G結束的四組不同長度的壹系列核苷酸，然後在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測，從而獲得可見DNA堿基序列的壹種方法。
在分子生物學研究中，DNA的序列分析是進壹步研究和改造目的基因的基礎。用於DNA測序的技術主要有Frederick Sanger發明的Sanger雙脫氧鏈終止法（Chain Termination Method）。DNA的復制需要：DNA聚合酶，雙鏈DNA模板，帶有3'-OH末端的單鏈寡核苷酸引物。
4種dNTP（dATP、dGTP、dTTP和dCTP）。聚合酶用模板作指導，不斷地將dNTP加到引物的3'-OH末端，使引物延伸，合成出新的互補DNA鏈。如果加入壹種特殊核苷酸，雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP），因它在脫氧核糖的3’位置缺少壹個羥基，故不能同後續的dNTP形成磷酸二酯鍵。
存在ddCTP、dCTP和三種其他的dNTP（其中壹種為α-32P標記）的情況下，將引物、模板和DNA聚合酶壹起保溫，即可形成壹種全部具有相同的5'-引物端和以ddC殘基為3’端結尾的壹系列長短不壹片段的混合物。
原理：
利用壹種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入壹種鏈終止核苷酸為止。每壹次序列測定由壹套四個單獨的反應構成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸，並混入限量的壹種不同的雙脫氧核苷三磷酸。
由於ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團，使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每壹種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調整，使反應得到壹組長幾百至幾千堿基的鏈終止產物。