配制
將34.6gCuSO?·5H?O溶於200mL水中，用0.5mL濃硫酸酸化，再用水稀釋到500mL待用；取173g酒石酸鉀鈉KNaC4H4O6·4H2O，50g NaOH固體溶於400mL水中，再稀釋到500mL，用精制石棉過濾；使用時取等體積兩溶液混合。
註意：在鑒定還原糖時該試劑必須現用現配，尤其是在高中生物學和化學中。
使用方法
還原糖：
1：向試管內註入2ml待測組織樣液。
2：向試管內註入1ml斐林試劑（甲乙液混合均勻，甲液量較多，乙液只需少量。然後再註入）。
3：將試管放入盛有50~65℃溫水的大燒杯中加熱約2min。
4：觀察試管中出現的顏色變化。
(應為淺藍色——棕色——磚紅色（沈澱）)
核糖、[麥芽糖、葡萄糖、果糖]（還原性糖）均為磚紅色沈澱；蔗糖、澱粉無變化（因為蔗糖、澱粉為非還原性糖）。
應用
醫學上用此試劑檢驗糖尿病。
從高中生物的角度來講，要明確斐林試劑與單糖中的葡萄糖反應生成磚紅色沈澱。