古詩詞大全網 - 古詩大全 - DYCZ28D垂直式電泳槽有關問題!!急...望有關專業人士解決!!

DYCZ28D垂直式電泳槽有關問題!!急...望有關專業人士解決!!

壹、組成部件 (壹)裝有鉑金絲的貯液槽壹對,配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。 (二)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時根據需要選擇適當厚度的玻璃板及梳子配套使用。(三)樣品孔模具(梳子)用於電泳加樣。 (四)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對,28D、30型為5對。 (五)橡膠管五根。兩根長的用於連接冷卻水的出入口;中等長度的兩根用於連接電極緩;中液的流出口;最短的壹根用於連接貯液槽間的冷卻水。 (六)導線1付。 二、使用方法 (壹)清洗部件 上述部件組裝前要徹底清洗幹凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑徹底清洗幹凈。清洗後的玻璃板應放在玻璃板支架上晾幹水後方能使用。 (二)組裝電泳槽 A、1、將四只固定螺桿插進壹只貯液框(半上槽)的相應孔洞中,然後將貯液框仰放在桌上。 2、左手拿凹型槽橡膠模框,右手的拇指與中指握住玻璃板的兩側邊緣插到橡膠模框內 (註意手指不能接觸灌膠面的玻璃板)。 3、將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上,其下緣必須對齊貯液槽框下緣。 4、雙手拿另壹只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,並使橡膠框上的凸出線位於貯液槽有機玻璃框中央。 5、裝上四只螺母,擰緊螺絲。註意擰緊螺絲時用力應均勻,最好用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊。 6、將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰極端),帶長玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽極端),在長玻璃板與橡膠框間有壹縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍擡起壹端即可趕去氣泡。待瓊脂完全凝固後才能灌膠。 B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠模框直接放入槽中,對稱擰緊螺絲後,用瓊脂封底邊。 (三)灌膠 1、先灌分離膠,待凝固後再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。 2、用細頭滴管吸取膠液,沿長、短玻璃板中間縫隙從壹端加入膠液。為防止產生氣泡,可稍拾起另壹端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝後就可形成凹形加樣孔。 3、為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能超過短玻璃板上緣。 4、膠凝固後即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有壹層折射率不同的亮區。 (四)加樣 1、松開連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內的蒸餾水,待水流完後,再夾緊夾子。 2、雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(註意千萬不要碰壞孔沿的字面)。 3、在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應超過上貯液槽短玻璃板上緣。 4、用微量註射器吸取壹定量的樣品加到長、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(註意加樣動作要輕,針頭不能碰壞膠面)。 (五)電泳 壹貯液槽導線與電泳儀的負極相連,下貯液槽導線與電泳儀的正極相連。檢查線路無誤,方可按照所要求的電壓電流進行電泳。 (六)取出膠板 電泳結束,旋松螺母,取出膠框,剝出玻璃板,在兩塊玻璃板下角空隙內,用刀片背面輕輕撬動,即可將膠面與壹塊玻璃板分開,將有膠板的玻璃板平放在桌上,雙手輕輕沿凝膠底將膠片托起,放在大培養皿中染色,膠板經漂洗、脫色後即可看到清晰的分離條帶。 註:DYCZ—28B、29型夾芯式電泳槽使用方法與此相同。DYCZ—28C型、28D型和30型電泳槽使用方法也與此相同,因是制作兩塊膠板,故實際形成三個貯液槽。請註意在操作時兩個膠室的短玻璃板都要向裏,中間為負極,兩邊為正極。 註意.可作兩塊膠的電泳槽,在作壹塊膠時,應將三頭導線都插在電泳槽上,以免放在桌上誤碰。