賴士葆出生臺中壹個三級貧戶之家，自嘲小時候“比陳水扁還窮”。本省籍的賴士葆是學者出身，分別擁有成功大學機械學士學位和政治大學企業管理碩士學位，後赴美國南加州大學深造，獲工業與系統工程博士學位。回臺灣後曾在政大企管所任教並擔任過所長，後又擔任過“國營”臺機公司監察人、證券管理委員會審查委員等職務，是專業的財經人士。1999年在新黨大老王建煊的勸說下決定代表新黨參選“立法委員”並當選。在三年的“立委”任期內表現突出，專業的財經背景加上“勤快問政”的風格很快使他獲得公眾普遍好評，在多份由媒體或學術機構所做的選民調查中，賴士葆在出勤率、質詢質量、審查預算等多個方面的評分都名列前茅。
2001年他再次代表新黨出馬角逐“立委”，原本以為篤定當選，卻不料因選票分散令其高票落選。連任失敗後賴士葆重回政治大學企管所任教授，還曾主持過政論節目。2002年臺北市長選舉期間為馬英九競選團隊擔任發言人，馬英九勝選後出任臺北市經濟發展委員會副總召集人，後又擔任了總召集人以及市政顧問團隊總召集人。2004年代表新黨加入中國國民黨參選臺北市“立法委員”並當選為第六屆區域“立法委員”。賴士葆也因其臺北市政團隊的身份而被認為是“馬家軍”的成員之壹，他以馬家軍的身份重回“立法院”被視為為馬英九競選“總統”鋪路。 2008年1月當選為第七屆區域“立法委員”
2008年2/1~3/26院會應出席15次，委員會應出席19次，總計34次，缺席18次。
2008年4/1~4/30院會應出席4次，委員會應出席13次，總計17次，缺席0次。