陰性對照能p出來,及有可能是PCR汙染了,實驗室的細菌很多,能用799f-1492r引物p出來很正常,妳重復陰性實驗,看所有試劑是否被汙染(水、buffer、酶都可能汙染,甚至是引物稀釋液)。後邊還要用,汙染的話就掉大了。
沒汙染,建議妳再重復試驗,設陰性對照的同時設陽性對照(用細菌做模板),如果陽性p出,陰性沒p出,就說明妳的實驗本身和引物是沒問題的(不要太輕易相信引物公司,誰知道引物是不是錯了或缺了)。再看妳的實驗組能否p出來,如果妳對自己提的模板有足夠信心,那就說明是陰性結果(可能性不大,據說799f-1492r至少能p出線粒體16srDNA基因吧),如果妳對所提模板沒有100%信心,我覺得,妳還是要再檢查下模板提取過程。
不知妳是否是針對內生菌還是線粒體,妳的DNA提取過程是否會損傷或去除這些DNA?