3.1．裝柱：將D101大孔吸附樹脂用丙酮浸泡過夜(大約15～18h)，用水浴回流8h，過濾(或抽濾)，用水洗至溶液：水(1∶2)不產生混濁為止，浸泡在水中，再進行裝柱，並在柱頂加少量氧化鋁，制成預處理柱，備用。
3.2．樣品預處理：精密吸取樣品5ml(固體樣品制成相當濃度的溶液)，加入已處理好的D101大孔樹脂層析柱中，用100ml水洗脫(含蔗糖樣品用300ml水)，洗液棄去(流速1.5ml／min)。再以原流速用30ml無水乙醇分次洗脫，收集洗脫液，蒸幹，殘渣用無水乙醇溶解，定量轉移至5ml容量瓶中，稀釋至刻度，作為供試品溶液。
3.3．標準曲線制備：精密吸取絞股藍皂甙標準液0、20、40、60、80μl，於10ml具塞試管中，在水浴上揮幹溶劑，精密加入5%香草醛冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸1.5ml，混勻。於60℃水浴上加熱15～20min，冰水浴冷卻，加入5.0ml冰醋酸，搖勻，以相應的試劑為空白，於545nm處比色測吸光度。
3.4．樣品測定：精密吸取供試品溶液100μl，置具塞試管中，按3.3．項下方法進行，測出吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中絞股藍皂甙的重量。