節目主持成員(MC)由八名韓國知名藝人組成，他們分別是：主持人：姜虎東，金C，殷誌源，MC夢（暫停壹切活動，詳見個人百科），李升基，李秀根（2007年8月5日第壹期成員）第二季回歸，金鐘民（2009年12月18日退伍當天回歸）第二季回歸，嚴泰雄（2011年3月加入）。
此外還有尚根(可愛的大白熊犬)作為節目的寵兒。
節目早期，盧洪哲(前14期)、池尚烈(前7期)、金英澈(第8-9期臨時代班)、申智(第10-12期臨時代班)曾擔任主持。後池尚烈因拍攝電視劇離開金C加入，盧洪哲因故離開李勝基加入，金鐘民服兵役期(071209至091220)MC夢加入。兩年後金鐘民回歸，全新的兩天壹夜正式出發！遺憾的是，金C在第144期100606後因為想專心從事音樂工作，而暫時離開了2天1夜節目組。MC夢第158期100919後因為疑似逃兵役事件退出，後證實無罪。110307新成員嚴泰雄加入，110909姜虎東因為疑似逃稅事件暫退演藝圈，後證實無罪，現已復出。 老大姜虎東
1970年6月11日生，身高182cm，外號：沙坑惡童、喜劇界天下壯士，2006年11月12日，在韓國新羅賓館與李孝珍結婚。2009年年末姜虎東成為第壹個連續兩年獲得KBS演藝大賞大獎的藝人。更多信息查看百科：姜虎東 吃辣達人金C
原名金代源，歌手，棒球選手，1971年11月15日生，四輯《雨和眼淚》主打歌《雨淚》和2010年新曲《告白》都非常好聽。因為那憂郁的氣質，人稱“遊吟詩人” 。在21裏十分照顧弟弟們。金C 小跟班李秀根
1975年2月10日生，身高168cm，搞笑藝人。2008年3月2日和比他小11歲的樸誌灩舉行了結婚儀式。2009年年末，李秀根獲得了KBS真人秀節目優秀主持人獎。更多信息查看百科：李秀根 殷初丁殷誌源
（韓語流行語中的“小學生”的意思）1978年6月8日生，歌手，身高174cm，1997年以元祖偶像組合“水晶男孩”隊長出道，人稱“殷閣下”。“初丁”是獨島那期在申智的引領下由盧宏哲開始叫的，誌源也喜歡這個形象，因為睡覺，說錯話也沒問題，做什麽都可以的。 更多信息查看百科：殷誌源 藝能野生猴子MC夢
1979年9月4日生，歌手，身高180 cm， 1998年以“People-Crew”組合出道，後單飛，並與2006年年底成為hiphop三冠王，並且頻繁出現在綜藝節目中。非凡的喜劇天賦之外更加重要的不惜形象的奉獻精神才是他多次獲得電視臺PD選擇獎的原因所在。更多信息查看百科：MC夢 舞王金鐘民
1979年9月24日生，韓國組合高耀太隊長，身高177Cm ，伴舞出身，最喜歡吃泡面，最在意頭型。2000年進入高耀太，03年當上高耀太隊長，03年底開始進入韓國綜藝界。 經過回歸初期的靜默，更多信息查看百科：金鐘民 黑洞李升基
1987年1月13日生，身高184cm ，歌手/演員/MC。稱號：國民弟弟、國民兒子。因在兩天壹夜中表現出某方面的缺陷，而被稱之為黑洞，金C取的。收視率100%的男子（前無古人後無來者《兩天壹夜》40%+《燦爛的遺產》40%+《強心臟》20%）。2004年6月5日《因為是我的女人》首次公演。 更多信息查看百科：李升基 無洞嚴泰雄
1974年4月5日生，身高181cm，以在2004年電視劇《豪傑春香》中深情的卞學道社長大叔形象而成名。第壹次初登場時因為沒個性被升基取名為無洞。 更多信息查看百科：嚴泰雄 搖滾寵兒尚根
性別：M，原名：Hebie（尚根，是池相烈取的名字），生日：2004年04月16日，品種：大白熊犬（庇裏牛廝山犬），興趣：和殷小學生&池尚烈玩耍。更多信息查看百科：尚根