身高：167cm，體重：50kg
男主角。為穗群原學園（Homurabara）高中部二年級學生及見習中的魔術師、10年前冬木市（Fuyuki）大火中的少數生還者之壹。被身為魔術師的衛宮切嗣所救出並收養，受衛宮切嗣的影響，是個英雄迷，並發誓長大之後壹定要成為“正義的夥伴”拯救所有受到苦難的人們。所以只要是他人的請求他從不會拒絕。很喜歡Saber，對她有特別的愛意（在前面自己壹直沒發現）。擅長分晰物件結構和修理電器。雖然是魔術師，不過除了強化及投影以外，並不會其他的基本魔術。
天生就對劍特別喜好。此外弓術也早已到達了大師的境界，“箭矢呢，是在射出前就已經射中了的”，因此他唯壹的失誤只是因為他本來就沒有要讓箭矢擊中紅心。擁有技能：投影所有理解範圍內的寶具（限定劍屬性）。由於本身的屬性是劍，雖然並非天才，亦沒有卓越的才能，但是憑借著認真和不懈的努力，終於得到了與其付出的努力相對應的成績，可以在暴走狀態下瞬間讀取眼裏所見的每把劍寶具，並將其投影出來。因此在UBW線中與英雄王匹敵。此外固有結界-無限劍制由於與Archer的心靈狀態不大相同，因此唱誦的咒文也有壹些差別。
根據投影的規則，就算完美的投影出寶具，也會比原先的寶具降低壹個等級。但是可以連同使用者的經驗壹同拷貝，所以只要投影出來的劍都能夠立刻的上手使用，仿佛是自己曾用過的劍壹樣。
士郎的自我治療能力是來是他體內Saber的鞘，此寶具必須與Saber建立契約以及她的魔力才能發動，靠近Saber效果更明顯。
此外英雄王的EA是采用太古時代的技術所創造出來的，因此連士郎都無法理解其構造。
衛宮 切嗣（えみや きりつぐ， Kiritsugu Emiya， 聲優：小山力也／臺灣：林谷珍）
衛宮士郎已故的養父，由於脫出被汙染的聖杯，魔術回路被掠奪八成、身體機能衰弱，於五年前去世，享年三十四歲。第4次聖杯戰爭的參加者，綽號是“ 魔術師殺手”，是Saber的禦主，代表愛因茲貝倫壹族出戰，冷酷無情，對目標貫徹到底毫不留情，然而卻命令Saber破壞了即將得到的聖杯，擁有“固有時間制禦”可以將自身的時間速度做加速或減緩。與士郎***同生活後變成了好父親，與藤村好像也很親近。
Saber（セイバー 聲優：川澄綾子／臺灣：雷碧文）
身高：154cm，體重：42kg，三圍：B73/W53/H76(cm)，屬性：秩序?善
本作FATE線的女主角。原型是英格蘭傳說中的國王，圓桌騎士團的首領——亞瑟王（King Arthur）。與士郎訂定契約?劍士的英靈，是個擁有壹頭亮麗金發與深綠眼睛的美少女。她的職階（class）被譽為所有從者中最優秀的。性格忠誠老實，壹本正經，不愛言談，也很有責任感，不過有時也會顯現出少女該有的樣子。到後半段對主人衛宮士郎，也產生了愛情（為傲嬌的代表人物之壹）。因為主人不懂得最基本的魔力回流魔術，因而無法補給魔力給她，必須自行由食物和睡眠裏補給，平時用風王結界（Barrier of the Wind King）令劍處於隱形狀態。特別喜歡女孩子不喜歡的獅子。
真實身份是不列顛傳說的英雄亞瑟王，真名為阿爾托利亞（Arturia Pendragon）的女性，擁有亞瑟王的神劍Excalibur（誓約勝利之劍）。來到現世，目的只有壹個，取得聖杯並實現回去古時不列顛，把王位傳於下壹代。裝置於士郎體內的寶具是Saber曾經遺失的劍鞘‘遺世獨立的理想鄉（Avalon）’，因此就算受了極近瀕死狀態的傷勢都能夠順利的復原。是當年切嗣為了救士郎而將概念武裝Avalon放在士郎體內的。在與英雄王的戰鬥下，使用了Avalon成功的遮斷了英雄王的EA，由於那是傳說中亞瑟王死後到達的"理想鄉"，因此就連五大魔法都無法對其幹涉。
遠阪 凜（とおさか りん， Rin Tohsaka， 聲優：植田佳奈／臺灣：楊凱凱）
身高：159cm 體重：47kg 三圍：B77/W57/H80(cm)
生日：2月4日 血型：O型
本作UBW（Unlimited Blade Work）線的女主角。與士郎在同壹個學園讀書的美女魔術師。為有著悠久歷史的魔術名門遠阪家的繼承人，傳說遠阪家祖上的大師父是魔法使，而遠阪家世代為冬木市這塊土地的管理者，繼承先父的遺誌參加聖杯戦爭。在學校扮演著優等生的身份，但事實她是壹名愛嘲諷和作弄別人的小惡魔型少女但同時也是壹個愛照顧人的大姐姐。作為魔術師有著高強的實力，不過經常在重要的地方發生失誤。
凜擅長的是|寶石魔術|，壹般魔力在自己體外後容易氣化難以保存，但是遠阪的血統與寶石相性相當的高，每日都可以把自己多余的魔力保存，日積月累下來下的威力(跟價值)都相當可觀，其中凜有十顆威力高達A+可傷害從者的寶石，但是在Saber的對魔力下也無用。
由於寶石魔術是屬於用完即丟的模式，花費相當的大，凜其實是個貧窮的大小姐。
Archer（アーチャー 聲優：諏訪部順壹／臺灣：黃天佑）
身高：187cm，體重：78kg，屬性：中立?中庸
與凜訂定契約?弓兵的英靈。經常嘲諷他人的現實主義者，不過與凜之間互相有著堅強的羈絆。喜歡單獨行動，明明是Archer卻喜歡近身戰，拿手的武器是雌雄雙刀－幹將莫邪，超人的弓技直到Fate/hollow ataraxia才展現。他本人自稱由於召喚時的事故忘了自己的真身為何，拿手的技術是家事全能，凜曾稱贊過他泡的紅茶非常好喝。
本次聖杯戰爭唯壹來自未來的英靈，真名是“エミヤ”(Emiya 衛宮)，是未來成熟的衛宮士郎，他戰鬥的壹個重要目的是要殺死衛宮士郎以避免重演他自己悲慘的命運。
具有魔術師的能力也是他象征性的寶具“固有結界（Bounded Field）”Unlimited Blade Works（無限劍制），曾經擊殺狂戰士（Berserker）4次。
伊莉雅斯菲爾?馮?愛因茲貝倫（イリヤスフィール?フォン?アインツベルン， Illyasviel von Einzbern， 聲優：門脅舞以／臺灣：林美秀）
身高：133cm，體重：34kg，三圍：B61/W47/H62(cm)
愛稱伊莉雅（イリヤ， Iriya），七名禦主（マスター，master）之壹，愛茲貝倫家為了聖杯戰爭而養育長大的人造人，是本次聖杯戰爭之中最強的禦主。因為被家族當成道具，所以個性上有點扭曲，平常是坦率天真的女孩，不過也有冷酷無情的壹面，是個令人聯想到雪的女孩。
父親是衛宮切嗣，是士郎名義上的姐姐，來日本的目的之壹就是來殺死切嗣，得知切嗣死亡後便把註意力放在士郎身上，年紀比士郎大1歲。
本身是聖杯的容器，負責接收從者的靈魂，當容納越多時會舍棄“不必要的人體機能”。
Berserker（バーサーカー 聲優：西前忠久／臺灣：黃天佑）
身高：253cm，體重：311kg，屬性：混沌?狂
狂戰士的英靈。其身份是海格力斯（Heracles，或譯為赫拉克勒斯、赫丘力士），是希臘神話中最偉大的英雄，身高高達253cm，擁有能使持有者重生並且記錄傷害持有者的寶具使其再壹次攻擊持有者[無效化]的寶具“十二的試練（God Hand）”。雖然職階是所有從者中最低的，但是擁有所有從者中最優秀的戰鬥能力,可惜因為狂化的效果,令他不能使出對軍寶具 射殺百頭。海格力斯是這次愛茲貝倫家犯規召喚來的從者，以犧牲理性的方式換取壓倒性的破壞力。
藤村 大河（ふじむら たいが， Taiga Fujimura， 聲優：伊藤美紀／臺灣：錢欣郁）
身高：168cm，體重：53kg
穗群原學園的教師，是士郎的班導，昵稱“藤姐”。同時是弓道部顧問，劍道5段。非常討厭被稱為“老虎”（tiger），被這樣叫的話會非常生氣。但是身上帶著竹劍加上虎紋的皮帶常被認為是虎迷。父親是黑道老大，家裏很有錢，不過還是經常去衛宮士郎家白吃白喝，是個天真率直的人。
間桐 櫻（まとう さくら， Sakura Matou， 聲優：下屋則子／臺灣：林美秀）
身高：156cm 體重：46kg 三圍：B85/W56/H87（cm）
生日：4月2日 血型：O型
本作HF（Heaven Feel）線的女主角。間桐慎二的妹妹，比士郎低壹個年級，同時是弓道社社員，對士郎而言像是妹妹壹樣的存在。在士郎面前總是充滿笑容，擁有沈穩的性格，過去經歷十分陰暗，，後來由於藤村大河和衛宮士郎的影響變得比較開朗，現在每日都到士郎的家準備早飯、晚飯。
本名是遠阪櫻，與凜是姐妹，因魔術師家族只會把魔術刻印傳給其中壹個繼承者所繼承，而間桐家同時要求過繼壹個擁有魔術回路的人當繼承人，所以遠阪櫻成為了間桐櫻，被間桐家折磨了11年，擁有與凜相當的魔術回路。
間桐 慎二（まとう しんじ， Shinji Matou， 聲優：神谷浩史／臺灣：林谷珍）
身高：167cm，體重：57kg
間桐櫻的哥哥，個性相當差勁，但因外貌、才能與家族因素相當受女孩子歡迎。士郎的同班同學，本來與士郎關系不錯，同時是弓道部副主將。雖然出生在魔術世家，但到了慎二這代已經完全沒有魔術回路，不過仍具備相當魔術知識，因為種種原因他也成了參加聖杯戰爭的禦主。
Rider（ライダー 聲優：淺川悠／臺灣：錢欣郁）
身高：172cm，體重：56kg，三圍：B88/W56/H84（cm），屬性：混沌?善
騎士的英靈。因此擅長在特殊地形（如高空）戰鬥。Rider這個職階同時必需擁有強力寶具才能擔任，使用可隱形的鎖鏈刃作為武器。FATE線被Sabar所殺，Heaven Feel線True Ending與遠阪姐妹和衛宮士郎壹起生活。
身分為希臘神話中的女妖美杜莎（Medusa，又譯梅杜莎）。如同此名有著駕馭傳說中天馬的騎乘能力，具有極高的機動性，持有寶具為“自我封印?暗黑神殿（Blood Fort Andromeda）”、“他者封印?鮮血神殿（Breaker Gorgon）”與“騎英之韁繩（Bellerophon）”，也擁有特殊技能石化魔眼（Cybele）。原為間桐櫻的從者，但在間桐臟現（Zoken Matou，間桐慎二之祖父）的命令下將令咒轉讓予間桐慎二。
美綴 綾子（みつづり あやこ， Ayako Mitsuzuri， 聲優：水澤史繪／臺灣：雷碧文）
身高：162cm 體重：50kg 三圍：B83/W58/H83(cm)
士郎的同學，擔任弓道部的社長，個性豪爽直快，不論在男女之間皆受歡迎，是遠阪凜的少數朋友之壹。曾被Rider吸過靈力，因而對其有恐懼感。
Assassin（アサシン 聲優：三木真壹郎／臺灣：吳文民）
暗殺者的英靈，有“氣配遮斷（Presence Concealment）”這樣能偷偷靠近暗殺對象的特殊技能。
佐佐木小次郎是日本戰國後期的著名劍客，鐘卷自齋的弟子。為了修煉武藝而遊歷各國，並獨自創立了自己的流派。相傳他相貌英俊，擅長使用三尺的長刀，由於劍身相當長，攻擊範圍大，據稱連天上的飛燕皆飛不出其長劍範圍，被壹切為二的絕招 故名“燕返”，與被後世尊為“劍聖”的宮本武藏於小倉島（今嚴流島）對決，戰敗被殺。其實小次郎的劍技未必輸於武藏，但武藏除了是壹名劍客外，也是名優秀的兵法家。相傳兩者相約在小倉島決戰，宮本武藏故意遲到，令小次郎心煩意亂。決戰中，武藏手持比對方更長的兵刃，更背對夕陽，利用落日余暉迷住佐佐木的視線，擊殺小次郎，再由沙灘不留足跡地脫離現場。兩強相爭，鬥智鬥力，小次郎力則有之，智有不逮。與出身於並不富裕的家庭的武藏相比，小次郎則是在擁護和贊揚的光環的環繞中成長起來的。但是，跟那些平庸的紈絝子弟不同，小次郎絕對是壹個劍術奇材。跟隨鐘卷自齋學習過富田流的小太刀技法時，鐘卷為了活用小太刀技法而讓小次郎使用大太刀，久而久之小次郎的大刀技法變得越來越純熟。小次郎的家傳的愛刀“物幹竿”（就是曬衣竿）便是長達三尺二寸的長刀，而小次郎的絕技"燕返"，更是能夠將長刀之利發揮到淋漓盡致的招式。可是，即使是這樣的小次郎，卻連"燕返"都沒有使出就敗在了宮本武藏的劍下。跟武藏決鬥時的小次郎，無法發揮自己刀長的優勢，因為武藏在決鬥之前，特意制作了壹把木刀，刀的長度是四尺二寸，比小次郎的"長光"長了整整壹尺。
傳說之劍技----燕返
佐佐木小次郎.嚴流小次郎者，越前守阪莊凈教寺村人，文祿四年（壹五九五）生。曾學劍於中條流鐘卷自齋通家. 中條流是有史可查的日本最為古老的劍術流派, 由中條兵庫頭長秀(?--1348)創建.而鐘卷自齋通家,連有著壹刀流鼻祖之稱的伊東壹刀齋也是其門下眾弟子之壹.且自創了鐘卷流,可謂已達劍聖之境,可為何在歷史上的名聲反不如兩位弟子;小次郎和壹刀齋（傳說鐘卷自齋因不滿弟子伊藤壹刀齋的懈怠而約其比試，反而敗在對方劍下，從此銷聲匿跡）。但可以知道的是他的劍術師範富田勢源是承中條流中的富田流壹脈,而富田流所擅長者,乃使用小太刀的技巧.小太刀的規格因為比正式的長刀要短近壹半，但正是因為它的“短”在戰鬥個可以發揮出靈活、快速等優勢,善於近身刺削，閃展騰挪.眾所周知,小次郎所用的兵器卻非小太刀,而恰恰與之相反,是最長的野太刀.其獨辟蹊徑,自成壹家,正是為真正劍術家所被要求的辟新徑之道. 據《擊劍業談》所記，壹日，勢源之弟治郎左衛門景政正式與他較量，原本想對頑劣子弟懲戒壹二，沒曾想數招之間，小次郎就以“虎切”的招數，擊敗了景政，由此壹戰成名，自創嚴流（巖流.願流.眼流）壹派，從此亦稱嚴流小次郎。
小次郎的壹生,所記錄不多,但傳說中不時提到壹個名字----燕返.作為他的得意技.燕返之名源至作為武者遊歷諸國的佐佐木小次郎在周防國（山口縣）斬落了空中飛翔的燕子，創出了絕學“燕返”的故事。
鳥類中,以飛翔速度著稱的便是燕子.可以劍斬燕,此等劍術,可謂神乎!但不幸的是,這壹絕技,因嚴流島之戰前並無傳授他人,至以從此失傳.為此,余考證許久,參考多家資料,得壹結論,燕返之技,實則乃拔刀術中極度高深的壹種.
最後創出拔刀之技: 使用柄部及刀刃比普通尺寸長得多的太刀，其有利點是在斬出壹劍做圓形運動時，因長度增加，劍尖部分的速度及攻擊力也會相當驚人。這便是攻擊與拔刀壹體的拔刀術.如果說得明白些,不過是超速的拔刀與收刀.(同時也超超超超級難練,我試過,幸好是鈍刀,否則我寶貴的手………)這壹點,恰巧與佐佐木小次郎所用長太刀相符,此為其壹.其配刀備前長船長光(又名物幹焯),根據《二天記》記載：“帶著三尺長的刀，備前長光的刀。”如此證明,小次郎之配劍長度是三尺上,非但遠遠長於小太刀壹尺五寸的長度,且比之壹般太刀也長出三十厘米左右.這種長度與當年林崎甚助重信所用的 “信國”極其相似.而拔刀術的攻擊,則深符日本劍道所講求的 “壹擊必殺”之原理,簡單說綜合起來壹個字:快!也正是這個快字,結合刀斬飛燕的典故,只有拔刀術所發出的高速劍招方可追上同樣以快聞名的燕子.這乃第二點.的確酷到沒話說了.也是拔刀術.而拔刀術的究極特性,在於以靜制動,後發而先至以克敵,且講求壹招必殺,絕無第二次出招的可能.當妳拔刀而出的瞬間,身上的破綻亦在同時暴露無遺,如果妳無法斃敵,斬空的那壹剎那,除非對方傻,否則必還以顏色,到時完蛋大吉的只可能是妳自己.而要做到以靜制動,後發而先至,最最至關重要的壹點便是需要心之平靜如水,以迅速反應出周圍特定事物(比如敵人的壹舉壹動,甚至細微的身體變化等等.以此決定出刀之最佳時刻以破之.
佐佐木小次郎對聖杯沒興趣，只是想與強者過招。沒有任何寶具，但憑著壹己之力練出了“燕返”（Swallow Reversal,同壹時間和對手斬出三刀），有著接近對人寶具級的威力。單論劍技的話是眾從者中最強的，連Saber也未必是其對手。
由Caster利用自身也是魔術師的規則漏洞召喚訂定契約，只擁有生存二十天的靈力，而且不能離開柳洞寺的大門，只能充當守門人。
Caster（キャスター 聲優：田中敦子／臺灣：林美秀）
身高：163cm 體重：51kg 三圍：B82/W57/H84（cm）
屬性：中立?悪
魔術師的英靈，能夠使用自神話時代以後就不存在的高等魔術。並以柳洞寺當作根據地，擅長策略。
真實身份為米蒂亞（Medea），在希臘神話中是以背叛和欺騙聞名的女神，寶具是“破盡萬法之符（Rule Breaker）”，用來破除任何契約能力。因自身也是魔術師的關系所以能召喚從者，因此她利用了這個規則漏洞召喚了Assassin。
用計殺死前主人後，被葛木宗壹郎撿到，與葛木訂下契約（非正式禦主）。
葛木 宗壹郎（くずき そういちろう， Souichirou Kuzuki， 聲優：中多和宏／臺灣：黃天佑）
身高：180cm，體重：70kg
穗群原學園的教師，忠誠老實沈默寡言而非常嚴格的人物，在學生們之中的評價其實不壞，在柳洞寺寄宿。
是Caster的禦主。過去是殺人鬼，似乎是屬於七夜壹支的人，因為暗殺了壹名政要，在冬木市隱居。
與其他的禦主的後援相反，在Caster魔力強化下可跟從者戰鬥，曾有擊倒過Saber的紀錄。沒有目標，純粹協助Caster取得聖杯。
柳洞 壹成（りゅうどう いっせい， Issei Ryudou， 聲優：真殿光昭／臺灣：黃天佑）
身高：170cm 體重：58kg
與士郎同年級的學生會長，也是士郎的朋友，忠誠老實認真的好青年。身為柳洞家的長子，是柳洞寺的繼承人，具有看穿遠阪凜的本質的尖銳洞察力。
Lancer（ランサー 聲優：神奈延年／臺灣：林谷珍）
身高：185cm，體重：70kg，屬性：秩序?中庸
槍騎兵的英靈。個性自我、豪放不羈，重視約定勝於性命。持有對人寶具“刺穿死棘之槍（Gae Bolg）”，號稱必中心臟的魔槍，另壹招為“穿刺死翔之槍”，乃威力極大的對軍寶具。真身為愛爾蘭神話英雄庫丘林（Cu Chulainn，又譯庫夫林）。壹開始為了殺人滅口而追逐撞見自己與Archer之間戰鬥的士郎，反而促使士郎在情急之下召喚出Saber，喜歡單獨行動與痛快淋漓的戰鬥，偵查任務是在Master命令下不得不為的工作。
言峰 綺禮（ことみね きれい， Kirei Kotomine， 聲優：中田讓治／臺灣：林谷珍）
身高：193cm 體重：82kg
生日：12月28日 血型：B型
此次的聖杯戰爭擔任監督的神父，有著言行復雜常人不能理解的地方。曾參加上次（第4次）的聖杯戰爭。遠阪凜在魔術方面的師兄，熱愛吃麻婆豆腐。
事實上在第五次聖杯戰爭中，他是遊戲的最大作弊者，控制了Lancer和Gilgamesh兩個從者，對士郎來說是相當於“絕對惡”的存在。
上壹次聖杯戰爭被切嗣射殺，因為聖杯流出的黑色物質無法汙染Gilgamesh而逆流回禦主身上，填補了他被射穿的心臟。另有壹說指他是埋葬機關代刑者的候補。
Gilgamesh（アーチャー 聲優：關智壹／臺灣：吳文民）
本作幻之第八名從者，前回（第4次）聖杯戰爭中與Saber留到最後的英靈，最後Saber也沒辦法得知他的身分，因為找不到他象征性的寶具。曾在前次對決時向Saber表白但失敗。也出現在動畫劇情中。個性超級自大，完全的自我中心，但本人自稱“不驕傲的哪算是王！”。
真名為英雄王“吉爾加美什”（（ギルガメッシュ， Gilgamesh）），為蘇美爾傳說中烏魯克的國王。寶具是王之財寶（Gate of Babylon），源自於基加美修收集全世界的寶具，將無數的珍貴兵器當成箭射出。寶具“天之鎖（Chain of Heaven）”神性愈高就會鎖得愈緊，還擁有唯壹的對界寶具—“開天辟地·創世之星”（Enuma Elish，名稱源自於巴比倫古代史詩），如果吉爾加美什認真起來將是本作最強，但是在三個路線中他完全沒認真過。
由於將寶具作為弓矢使用的方法，因此在第四次聖杯戰爭職階為Archer。
除了他大概沒有其他英靈可以抵抗聖杯的黑色物質，他的高傲就連黑色物質也沒有辦法汙染，