1．
37℃水浴預熱培養液（HUVEC-004）。
2．
從液氮中取出HUVEC的細胞管，快速將其置入37℃水浴中解凍，直到管中只剩下最後壹片結晶（註意：不要讓水沒過產品管）。
用75%的酒精擦拭產品管外壁。
3．
將HUVEC的細胞管中的細胞移至15ml無菌離心管中，慢慢逐滴加入預溫的37℃
基礎培養液（HUVEC-004B）培養液4－5ml混勻，邊加邊搖勻。
4．
用1ml的培養液沖洗HUVEC的細胞管，向15ml離心管中加入沖洗的細胞懸液，邊滴加邊搖勻。
5．
取10μl細胞懸液和10μl臺盼藍混勻後，取10μl計數。
這壹步驟非常重要，能確定您收到的產品是否合格（詳見如何計數復蘇的細胞）
6．
HUVEC的細胞懸液在1500rpm，室溫條件下，離心10分鐘，去除上清。
7．
加HUVEC完全培養液4－5ml,
輕輕混勻細胞，備用。
8．
接種前將
T25培養瓶中的包被液吸去，按2500－5000個細胞/cm2接種細胞。（1支冷凍的細胞可以種壹瓶T25培養瓶）
9.
每個HUVEC的細胞培養瓶中加完全培養液（HUVEC-004）3-5ml,
後置於37℃、5%CO2
培養箱內培養。