堿裂解法提取質粒的方法如下：
壹、實驗原理：
堿裂解法提取質粒是根據***價閉合環狀質粒DNA 與線性染色體DNA 在拓撲學上的差異來分離它們。在pH 值介於12.0 ～12.5 這個狹窄的範圍內，線性的DNA 雙螺旋結構解開而被變性，盡管在這樣的條件下，***價閉環質粒DNA 的氫鍵會被斷裂，但兩條互補鏈彼此相互盤繞，仍會緊密地結合在壹起。
當加入pH 4.8 的乙酸鉀高鹽緩沖液恢復pH 至中性時，***價閉合環狀的質粒DNA 的兩條互補鏈仍保持在壹起，因此復性迅速而準確，而線性的染色體DNA 的兩條互補鏈彼此已完全分開，復性就不會那麽迅速而準確，它們纏繞形成網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA ，蛋白質-SDS 復合物等壹起沈澱下來而被除去。
二、操作步驟：
1. 準備20ml滅菌過的培養管，編號，分別加入8ml LB培養基，再加入8?l 相應抗生素，可適量多加；
2. 用10?l 白色槍頭挑取挑取單個菌落至培養管中，37℃震蕩過夜（274rpm）；
3. 取2ml過夜培養的菌液加入離心管中，室溫10000rpm離心2min，去上清；（可重復步驟2，直至菌液離心完）（去上清時用紙吸壹下）
4. 向留有菌體沈澱的離心管中加入250?l Buffer P1（含RNase A），使用移液槍充分混勻，懸浮菌體菌體；
5. 向離心管中加入250?l Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻4~6次，獲得澄清的裂解液；（劇烈混合會使剪切染色體DNA，降低質粒純度）
6. 向離心管中加入350?l Buffer N3， 立即溫和地上下顛倒混勻4~6次，此時出現白色絮狀沈澱。室溫10000rpm離心15min；
7. 小心將步驟6中所得的上清液轉移至潔凈的吸收柱中。要保證沒有吸入沈澱和細胞碎片。室溫10000rpm離心1min，至裂解物完全通過吸收柱,倒掉收集管中的廢液；
8. 向吸附柱中加150?l Buffer PB，10000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液；
9. 向吸附柱中加400?l? Buffer PW（檢查是否加入無水乙醇），10000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液。再空離壹次，2min（此時可以加熱 Buffer EB，65~70℃）；
10. 將吸附柱置於壹個新的離心管中，打開蓋子，吹風4min左右（確保乙醇被去除，乙醇會影響下面的步驟）；
11. 向吸附柱的吸附膜中間部位加90?l Buffer EB（pET系列拷貝數低，加EB 70μl即可），室溫靜置2min。10000rpm離心1min；
12. 把液體倒回吸附柱，在10000rpm離心1min；
13. 混合質粒至壹個離心管中，做好標記，開蓋室溫放置兩小時左右。-40℃保存質粒。