高效液相色譜法,妳可以簡單地想象,固定相是壹個多空海綿狀的柱形結構,樣品在孔洞中進進出出。因為各個物質的吸附能力不同,所以才會在色譜圖中拉開距離。
和實驗相關的參數:
1、保留時間-也就是可以定性的數據參數
如果使用同樣的色譜柱,同樣的流動相,分析同樣的樣品,那麽這個樣品的保留時間,應該是固定的。不同保留時間的色譜峰,應該表現出的是不同的物質。如果妳跑的是反相色譜,那麽色譜峰越靠後,它對應物質的極性也就越小。
2、峰面積-也就是可以定量的數據參數
這是妳在色譜圖中可以讀出來的參數,在同壹個色譜條件下,同壹個物質的濃度和峰面積是成正比的。也就是說,如果妳配制1.0mg/ml的X物質,進樣後峰面積是10000,那麽,妳配制0.5mg/ml的X物質,進樣後峰面積差不多就是5000
3、波長-這個是可以順利進行試驗的前提條件
同壹樣品,同壹方法,同壹色譜柱,在不同波長的峰面積是不同的。壹個物質指在某些特殊波長下有吸收。比如壹個物質在210nm和254nm處有吸收。那麽波長在280nm處可能無法檢出該物質。所以壹個實驗方法開始時要進行波長掃描。