由於生化測試測量的吸光度為相對吸光度，所以從理論上說，所有終點法的測試都需要把試劑本身的吸光度扣除。試劑本身的吸光度就是 試劑空白。測量方法是按照正常測試的試劑和樣本量，把樣本換成蒸餾水來測量。
在傳統手工方法中，每次測定都要做至少三個管：測定管、標準管、空白管。其中空白管是試劑加蒸餾水，測出來也就是試劑空白。因為 操作環境、儀器狀態、試劑穩定性等變異，所以要求每次都要測定試劑空白，稱為實時試劑空白。
在全自動分析儀上，大體上是模擬手工操作。但許多全自動分析儀為追求速度，在設計上采用壹些折中方法來測定試劑空白。以日立全系 列生化儀為例。該系列分析儀是做不了實時試劑空白，因為它們全是先加入樣本後加試劑，為了折中，只好在定標時做壹個試劑空白，保 存起來，需要扣除試劑空白時再減這個預先保存的值。這種做法，對於比較穩定的試劑來講，對結果影響不大。
通俗的講，日立的儀器工作流程中首先是將標本加入到比色杯中，然後依次加入R1試劑、R2試劑，所以試劑空白在每個測定項目曲線 中是無法看到的。但是7170從CALIBRATION中是可以看到的，S1ABS就是代表試劑空白吸光度，在CALIBRAT ION畫面裏的下方找到Reaction Monitor（反應監察），其中STD（1）就是代表試劑空白反應曲線。為了減小誤差，日立儀器會連續做兩次測定，所以妳看到 FIRST和SECOND兩條，計算時是取他們的平均值。做試劑空白目的之壹就是觀察試劑是否穩定，積極采取措施糾正。對於日立 的這種試劑空白測定很多儀器都采用這種方法，也叫做試劑空白校準。
總的說來，自動生化儀上的試劑空白壹般表現為零點吸光度，該吸光度是通過校準確立的。