在進行生物切片實驗時,需要註意樣本的選擇和處理、切片的制備和染色、實驗室安全和衛生、儀器設備的備件和維護等方面的要領和註意事項,以保證實驗的可重復性和有效性。
下面是壹些常規組織切片的註意事項:
-取材的好壞,直接影響切片的質量。醫生在取材時,首先要有壹把鋒利的取材刀,在切割組織時要避免取材刀來回拖拉,切取的組織塊厚薄要均勻,壹般厚度以0.2~0.3cm為適,較容易發脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結、大塊癌組織等可適當厚壹點,而脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織應取薄壹些;淋巴結應修掉兩側球冠,並盡量剔除周圍的脂肪組織。在取材中還應十分註意組織內是否有縫線或骨組織,如碰到不可避免的鈣化組織,應與技術室講明,在切取纖維組織、肌肉組織、胃腸道時,應註意纖維及肌肉的走向,取材時盡可能按與纖維平行走向切取為佳。
-固定:固定是為了使細胞內外滲透壓平衡,防止細胞變形和水分丟失。常用的固定方法有化學固定和物理固定兩種。化學固定是指用甲醛等化學試劑將細胞固定在材料上;物理固定是指用乙醇、丙酮等有機溶劑將細胞浸泡在其中。
-透明:透明是為了使細胞內外滲透壓平衡,並且可以使染料進入細胞內部。常用的透明方法有乙醇透明和丙酮透明兩種。
-包埋:包埋是將經過固定和透明處理後的樣品放入模具中進行壓制成型的過程。常用的包埋材料有明膠和瓊脂糖兩種。
-切片:切片是將包埋好的樣品沿著模具邊緣進行切割成薄片的過程。