從蓖麻籽勻漿中直接制備粗毒,根據蓖麻毒素能與Sepharose—6B上的半乳糖殘基結合,然後分別用Tris—HCl洗去雜蛋白和Tris—HCl半乳糖溶液梯度洗脫,得到完整的毒性很強的蓖麻毒素。
B鏈具有 2 個結構域,這 2 個結構域具有同源性,由基因復制產生。結構域 1 中含有氨基末端,而結構域 2 中含有羧基末端。蓖麻毒素 B 鏈由 267 個氨基酸殘基組成,具有結合活性,是蓖麻毒素的結合鏈。
結構特點:
蓖麻毒素(約占蓖麻蛋白的 5%,分子量約為 66 kD)是壹種Ⅱ型異二聚體核糖體失活蛋白,由核糖體失活酶(蓖麻毒素 A 鏈)及與半乳糖/N-乙酰半乳糖胺特異結合的凝集素(蓖麻毒素 B 鏈)組成,二者之間連接壹個二硫鍵。
對蓖麻毒素的壹級結構進行分析發現,A 鏈含有 267 個氨基酸殘基,分子量約為 32 kD,具有催化活性,是蓖麻毒素蛋白的效應鏈。A 鏈中 N 端第 4 位及 C 端附近分別含有 1 個賴氨酸(Lys)殘基,是蓖麻毒素 A 鏈毒性作用的關鍵中心。