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經多聚甲醛固定的冰凍切片要做抗原修復嗎?

冰凍切片壹般不需要抗原修復,石蠟切片需要抗原修復。目前進行的常規石蠟切片標本,壹般均用甲醛固定。事實上經甲醛固定的部分組織細胞,免疫組化標記敏感性明顯降低,其原因為:(1)在用甲醛固定過程中形成醛鍵而封閉了部分抗原決定簇;(2)甲醛在保存過程中會形成羧甲基,而封閉抗原決定族;(3)在用固定劑固定時,會使蛋白與蛋白之間發生交聯,也可能會封閉抗原決定族。因此在染色時為取得良好的染色效果,必須對有些抗原進行預先修復。對於冰凍切片用丙酮或甲醛固定效果較好。因為妳是用4%PFA固定還是要考慮做抗原修復的。修復抗原的方法很多,壹常用的抗原修復方法有微波修復法,高壓加熱法,酶消化法,水煮加熱法等,常用的修復液是pH6.0的0.01mol/L的檸檬酸鹽緩沖液。也有人用蒸餾水修復抗原,方法如下:將脫蠟水洗過的切片放入盛有蒸餾水的容器中,置微波爐內高中火5 min煮沸,中低火維持沸騰狀態10 min。