1、甘氨酸乙酯鹽酸鹽與亞硝酸鈉反應而得。其制備方法是將亞硝酸鈉溶於水中，以二氯乙烷為溶劑壹並加入到反應器內，維持溫度18～20℃，然後用稀硫酸調節甘氨酸乙酯鹽酸鹽水溶液的pH=1，將此溶液滴加到亞硝酸鈉溶液中，滴加時的溶液溫度維持在18～20℃，滴加完畢後，再繼續攪拌0.5h，分出有機層，水層再用二氯乙烷萃取1次，合並油層，即為重氮乙酸乙酯的二氯乙烷溶液，備用於制造菊酸或二氯菊酸。也可以用甘氨酸乙酯鹽酸鹽溶於乙酸及乙酸鈉組成的緩沖溶液，再加入二氯乙烷為溶劑，在10～15℃滴加亞硝酸鈉溶液，滴加完後，再繼續攪拌15 min，分出有機層即為重氮乙酸乙酯的二氯乙烷溶液。反應方程式：NH2CH2COOC2H5·HCl+NaNO2+HCl→N2CHCOOC2H5+NaCl+H2O
2、實驗室以甘氨酸乙酯鹽酸鹽為原料，在5%的H2SO4溶液中與NaNO2作用來制備。
3、註意：全部操作應在良好通風櫥內進行，操作務必註意。制備後要及早應用，不能放置。
在裝有攪拌器、滴液漏鬥、溫度計和氮氣導入管的四頸瓶中加入140克(1摩爾)氨基乙酸乙醋鹽酸鹽溶於250毫升水的溶浪和600毫升二氯甲烷(註)，冷至壹5℃，通氮氣，攪拌下加入冰冷的83克(1.2摩爾)亞硝酸鈉溶於250毫升水的溶液.溫度降至壹9℃，滴入95克5%(重i-}比)的硫酸，約3分鐘.采用壹23℃的冷浴時反應溫度最高升至壹1℃.10分鐘內不再放熱時反應即告結束。反應混合物轉入用冰冷卻的分液漏鬥，將黃壹綠色二氯甲烷層側入1升冷卻的5%碳酸氫鈉溶液中，水層用75毫升二氯甲烷萃取.二氯甲烷和碳酸氛鈉溶液重行轉入分液漏鬥，振搖至試紙不顯微酸性.分出有機層，轉入幹燥分液漏鬥，加入15克粒狀無水硫酸鈉振搖5分鐘，過濾，經減壓分餾除盡溶劑(室溫，300mm，最後可達35，20mm 得到90-100克黃色油狀物的重氮乙酸乙醋，產率79壹88%。