1、酵母菌培養:每天對壹瓶培養基用0.25g的幹酵母粉在酒精燈旁進行等質量無菌接種,接種密度約為6×107個/mL。這樣7個培養基中的初始種群密度基本壹致。
接著將接種後的培養基放到30℃的恒溫培養箱中進行培養,七天後第壹天培養的酵母菌就培養了7天,而第七天培養的就只培養了1天。培養結束後將所有培養基放到4℃低溫保存,在這個溫度下酵母菌即停止生長,短時間內又不會死亡。
2、培養液的稀釋與染色:實驗前分別取1mL搖勻的培養液加入到已經盛有48mL蒸餾水的錐形瓶中,再加1mL0.2%亞甲基藍水溶液,使原培養液稀釋50倍。亞甲基藍可以使死細胞染成藍色,而活細胞不會,可以幫助我們在顯微鏡下區別死活細胞。
3、使用血細胞計數板進行計數:血細胞計數板是壹個特制的加厚載玻片,由中間“H”形的導流槽將計數板分成了兩個臺面,每個臺面上各有壹個計數室。通過在顯微鏡下對計數室中酵母菌細胞或其他細胞進行計數,可以計算出原培養液中細胞的密度。