①在反轉錄酶的作用下，以已知基因片段內部特異性引物啟始cDNA第壹條鏈的合成。
②RNase混合物降解模板mRNA，純化cDNA第壹條鏈。
③用末端轉移酶在cDNA鏈3'端加入連續的dCTP，形成oligo dC尾巴。
④以連有oligo dG的錨定引物和基因片段內部特異的nested引物進行PCR擴增，以期得到目的片段，並可用nest PCR進行檢測。
(2)3'RACE
①在反轉錄酶的作用下，以連有可以和：poly A配對的oligo dT的錨定引物啟始cDNA第壹條鏈的合成。
②用RNase H降解模板mRNA。
③用通用錨定引物和基因片段內部特異引物進行PcR擴增得到目的3'片段，並可用nest PcR的方法繼續進行檢測和擴增。[考點]RACE技術。RACE(rapid amplification of cDNA ends)技術是用於從已知cDNA片段擴增全長基因的方法，它根據已知序列設計基因片段內部特異引物，由該片段向外側進行PCR擴增得到目的序列。用於擴增5'端的方法稱為5'RAcE，用於擴增3'端的稱為3'RACE。