1、組成成分:
A、1×TE緩沖液:10 mmol/L Tris.Cl;1mmol/L EDTA,pH 8.0。
B、1×TAE緩沖液:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA,pH 8.0。
C、1×TBE緩沖液:45 mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA,pH 8.0。
2、用途:
A、TE緩沖液:壹般用作溶解劑或保持劑,常用於溶解DNA,能穩定儲存DNA。
B、TAE緩沖液:生物學中使用最廣泛的核酸電泳緩沖液,主要用於DNA的瓊脂糖凝膠電泳。
C、TBE緩沖液:生物學中常用的核酸電泳緩沖液,主要用於DNA的瓊脂糖凝膠電泳。
3、TAE和TBE緩沖液的選擇:
TAE和TBE緩沖液都可以用於DNA的瓊脂糖凝膠電泳,兩者各有利弊,應根據實際情況選擇不同的緩沖液。
TAE和TBE緩沖液的比較
TAE緩沖液:
成分:40 mmol/L Tris-乙酸;2mmol/L EDTA
優點:超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子 緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用。質量電泳大於 13kb 的片段時分離效果好,可用於回收 DNA 片段。
缺點:緩沖容量小,長時間電泳(如過夜)不可選用。
TBE緩沖液:
成分:45mmol/L Tris-硼酸;1mmol/L EDTA
優點:緩沖能力強,適合較長時間電泳,分辨率較高,電泳小於 1kb 的片段時分離效果好。
缺點:緩沖液中的硼酸成分會影響 DNA 回收效率以及後續的酶反應實驗。
4、註意:
TBE濃溶液長時間存放後會形成沈澱物,出現沈澱後應予以廢棄。