PCR:壹種快速的DNA復制方法,由變性--退火(復性)--延伸三個基本反應步驟構成。
RT-PCR:反轉錄PCR(reverse transcription-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的壹種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,壹條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA(cDNA),再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。
QRT-PCR在RT-PCR體系中同時加入內參標基因的引物,使目的基因和內參基因在同壹條件下同時擴增。在擴增反映結束之後,可以通過凝膠電泳的方法對擴增產物進行半定量分析,但分析的是PCR終產物,不能準確分析未經PCR信號放大之前的起始模板量。
real-time PCR:實時PCR(real-time PCR)屬於定量PCR(Q-PCR)的壹種,以壹定時間內DNA的增幅量為基礎進行DNA的定量分析。
Real-timePCR與reverse transcription PCR相結合,能用微量的RNA來找出特定時間細胞組織內的特別表達的遺傳基因。這兩種RT PCR的組合又被稱之為定量RT-PCR(QRT-PCR)。
擴展資料:
聚合酶鏈式反應是壹種用於放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點,是能將微量的DNA大幅增加。
PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基於聚合酶制造的PCR儀實際就是壹個溫控設備,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。
參考資料: