SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳原理
聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺(簡稱Acr)和交聯劑N，N’壹亞甲基雙丙烯酰胺(簡稱Bis)在催化劑過硫酸銨(AP)，N，N，N’，N’?四甲基乙二胺(TEMED)作用下，聚合交聯形成的具有網狀立體結構的凝膠，並以此為支持物進行電泳。
聚丙烯酰胺凝膠電泳可根據不同蛋白質分子所帶電荷的差異及分子大小的不同所產生的不同遷移率將蛋白質分離成若幹條區帶，如果分離純化的樣品中只含有同壹種蛋白質，蛋白質樣品電泳後，就應只分離出壹條區帶。
SDS為壹種陰離子表面活性劑能打斷蛋白質的氫鍵和疏水鍵，並按壹定的比例和蛋白質分子結合形成密度相同的短棒狀復合物，不同分子量的蛋白質形成的復合物的長度不同，其長度與蛋白質分子量呈正相關，使蛋白質帶負電荷的量遠遠超過其本身原有的電荷，掩蓋了各種蛋白分子間天然的電荷差異。
因此，各種蛋白質SDS復合物在電泳時的遷移率，不再受原有電荷和分子形狀的影響，只是分子量的函數。這種電泳方法稱為SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(簡稱SDS—PAGE)。
由於SDSPAGE可設法將電泳時蛋白質電荷差異這壹因素除去或減小到可以忽略不計的程度，因此常用來鑒定蛋白質分離樣品的純化程度，如果被鑒定的蛋白質樣品很純，只含有壹種具三級結構的蛋白質或含有相同分子量亞基的具四級結構的蛋白質，那麽SDS—PAGE後，就只出現壹條蛋白質區帶。
SDS—PAGE可分為圓盤狀和垂直板狀、連續系統和不連續系統。本實驗采用垂直板狀不連續系統。所謂“不連續”指電泳體系由兩種或兩種以上的緩沖液、pH和凝膠孔徑等所組成。
擴展資料
SDS-PAGE壹般采用的不連續緩沖系統，與連續緩沖系統相比，能夠有較高的分辨率。濃縮膠有堆積作用，凝膠濃度較小，孔徑較大，把較稀的樣品加在濃縮膠上，經過大孔徑凝膠的遷移作用而被濃縮至壹個狹窄的區帶。當樣品液和濃縮膠選TRIS/HCl緩沖液，電極液選TRIS/甘氨酸。
電泳開始後，HCl解離成氯離子，甘氨酸解離出少量的甘氨酸根離子。蛋白質帶負電荷，因此壹起向正極移動，其中氯離子最快，甘氨酸根離子最慢，蛋白居中。
電泳開始時氯離子泳動率最大，超過蛋白，因此在後面形成低電導區，而電場強度與低電導區成反比，因而產生較高的電場強度，使蛋白和甘氨酸根離子迅速移動，形成壹穩定的界面，使蛋白聚集在移動界面附近，濃縮成壹中間層。
此鑒定方法中，蛋白質的遷移率主要取決於它的相對分子質量，而與所帶電荷和分子形狀無關。
百度百科-聚丙烯酰胺凝膠電泳
百度百科-SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳