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單倍體如何育種?

用配子體育成單倍體植株,再經過染色體加倍,作為育種材料或從中直接選優育成新品種的方法。單倍體因母株的起源和倍性不同,可分為壹元單倍體(monohaploid)和多元單倍體(polyhaploid),多元中又分為同源多元單倍體(autopolyhaploid)和異源多元單倍體(allopo-lyhaploid)。

果樹生長結果周期長,且多數自交不親和,很難獲得純系。直接培育單倍體加倍成純系,開辟了利用純系進行果樹育種的新途徑。利用單倍體能增強誘變育種的誘變效果,並可更好地利用雜種優勢,有利搞清果樹遺傳規律,縮短育種程序,提高雜交育種預見性。

早期誘導單倍體是采用輻射線照射、化學藥劑處理、溫度刺激、遠緣授粉和延遲授粉等方法,誘導孤雌或孤雄生殖,培育成單倍體植株。也有的種類在有性後代中選擇小的種子播種,或生長發育矮小植株通過鏡檢篩選獲得單倍體。這些方法產生單倍體的頻率都很低,未能在育種上實際應用。20世紀70年代後,由於細胞工程的迅速發展,通過離體培養單性配子體,主要是培養花藥的方法,大大提高了誘導單倍體植株的頻率。果樹的單倍體育種70年代開始研究,現在蘋果、楸子(海棠果)、葡萄、柑橘、草每、荔枝和龍眼等也獲得了花粉單倍體植株,有的花粉植株已開花結果。

從花藥育成單倍體的過程是:首先接種培養花藥。有的果樹經胚狀體發育成小植株,如蘋果、柑橘等;有些經愈傷組織分化不定芽,長成完整植株,如海棠果。由花藥誘導單倍體植株能否成功,主要與以下因素有關:①接種材料的遺傳類型。如山東省釀酒葡萄研究所曾經接112個葡萄品種的花藥,只有6個品種分化出植株。②花粉的發育時期。蘋果的接種適期為四分體和單核期,海棠果單核晚期,葡萄四分體至單核晚期,荔枝單核晚期,柑橘單核中、晚期。由於發育時期的不同步性,還難以精確掌握。③培養基。誘導蘋果花藥胚狀體的適宜培養基是MS培養基,如用N6則只長愈傷組織。荔枝胚狀體成株的培養基是MS附加KT0.1、蜂王漿600、L H500、B11、B61、G A3400(單位均為毫克/升)。如果B1、B6少於1毫克,胚狀體即不能正常生長,並很快壞死。如果不加GA3,胚狀體多不能抽莖長葉。加蜂王漿可防止胚狀體長愈傷組織或老化變褐。④接種前的處理。柑橘在接種前將花藥置3℃低溫下處理5~10天,可提高胚狀體誘導率。⑤培養條件。柑橘花藥培養的適溫為20~25℃,高於25℃即不能誘導出胚狀體。

單倍體植株育成後,因單倍體缺少壹套染色體,難於結實或存活,所以必須要加倍成純合二倍體。有些單倍體植株可以自然加倍,有的需要人工加倍。可分別按以下三種育種程序進行育種:①加倍後直接選擇優良類型,利用無性繁殖育成新品種;或選擇自花結實的類型,利用有性繁殖育成新品種。此法主要用於砧木育種。②加倍後選配優勢組合,生產雜種種子,直接播種。此法主要用於實生繁殖的果樹,也可把最佳優勢組合通過無性繁殖固定,成為無性系品種。③對雙單倍體再進行理化誘變,將性狀優良的突變體加倍,選出優良品種,利用無性繁殖固定。