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測定蛋白質相對含量的方法有哪些

測定蛋白質相對含量的方法:直接測定UV法、雙縮脲法(Biuret法)。

直接測定UV法:這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg 公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然後直接測試蛋白質。從而顯得結果很不穩定。

蛋白質直接定量方法,適合測試較純凈、成分相對單壹的蛋白質。紫外直接定量法相對於比色法來說,速度快,操作簡單;但是容易受 到平行物質的幹擾,如DNA的幹擾;另外敏感度低,要求蛋白的濃度較高。

雙縮脲是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出壹個分子氨後得到的產物。在強堿性溶液中,雙縮脲與CuSO4形成紫色絡合物,稱為雙縮脲反應。凡具有兩個酰胺基或兩個直接連接的肽鍵,或能過壹個中間碳原子相連的肽鍵,這類化合物都有雙縮脲反應。

紫色絡合物顏色的深淺與蛋白質濃度成正比,而與蛋白質分子量及氨基酸成分無關,故可用來測定蛋白質含量。測定範圍為1~10mg蛋白質。

蛋白質含量:

蛋白質是組成人體壹切細胞、組織的重要成分。機體所有重要的組成部分都需要有蛋白質的參與。壹般說,蛋白質約占人體全部質量的18%。

蛋白質(protein)是生命的物質基礎,是有機大分子,是構成細胞的基本有機物,是生命活動的主要承擔者。沒有蛋白質就沒有生命。氨基酸是蛋白質的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在壹起的物質。

機體中的每壹個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16%~20%,即壹個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.6~12kg。人體內蛋白質的種類很多,性質、功能各異,但都是由20多種氨基酸(Aminoacid)按不同比例組合而成的,並在體內不斷進行代謝與更新。