1、先將壹件紅茶菌和壹斤水的比例調好，再用消毒過後的紗布包住茶葉和白糖，壹斤水大概需要2、5克至5克的茶葉和50克白糖，再放進調好的比例水燒開。
2、燒開以後，當茶糖水冷卻到溫度40度以下後，再把包茶葉和白糖的紗布拿出來，這時把茶糖水倒入消毒過後的玻璃瓶中。註意：這時不能把玻璃瓶給倒滿，大概倒滿四分之三即可，留部分空間保留壹點空氣。
3、再把紅茶菌菌種全部倒入玻璃瓶中，用幹凈消毒後的紗布把瓶口封好，再用繩子紮好瓶口，放在光線好的地方靜放，不要移動。
4、紅茶菌會根據氣溫的高低來發酵。氣溫高的所需時間短，氣溫低的所需時間長。壹般25至30度需要四天左右，15至25度需要6天，15度需要8至10天。