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光度分析的方法?

光度分析的方法

(1)目視比色法

用眼睛比較溶液顏色的深淺以確定待測組分含量的方法,稱為目視比色法。最常用的是標準系列法。它是用壹套質料相同、大小形狀相同、帶有刻度、等體積的比色管組成。將壹系列不同體積的標準溶液依次加入比色管中,取壹定量的待測溶液置於另壹比色管中,然後分別加入等量的顯色劑及其它試劑,最後用水稀釋至刻度(比色管容量有10、25、50、100mL等幾種)。搖勻並放置壹定時間待反應達平衡後,從管口垂直向下觀察,比較待測液與標準溶液顏色的深淺。若待測液與某壹標準液顏色深度壹致,則說明兩者濃度相等;如果待測液的顏色深度介於某相鄰兩標準之間,則取其平均值作為待測液的濃度。

目視比色法儀器簡單、操作簡便、靈敏度也較高、顯色反應如不遵從比耳定律也能進行。因而它被廣泛應用於準確度要求不高的常規分析中。

目視比色法的主要缺點是準確度不高,如果待測溶液中存在第二種有色物質,甚至無法進行測定。另外,由於許多有色溶液顏色不夠穩定,標準系列不能久存,經常在測定時需同時配制。

(2)光度分析法

通常,將使用光電比色計測定有色溶液的吸光度進行定量分析的方法稱為光電比色法,將使用分光光度計進行測定的方法稱為分光光度法。兩種方法的測定原理是相同的,所不同的僅在於獲得單色的方法不同,光電比色法是采用濾光片,而分光光度法是利用棱鏡或光柵單色器。由於兩者均基於吸光度的測定,所以可統稱為光度分析法。操作步驟都是測量壹系列標準溶液的吸光度,繪制工作曲線。並在相同條件下,測量待測試樣的吸光度,由工作曲線上查出試樣中待測物的含量。

光度法與目視比色法比較,具有下列優點:

a.使用儀器代替人眼進行測量,消除了人工的主觀誤差,從而提高了準確度。

b.測定溶液中有其它有色物質***存時,可以選擇適當的單色光和參比溶液來消除幹擾,因而可提高選擇性。

c.使用標準曲線法可簡化手續,加快分析速度。

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