物理化學性質角度;因為PEG的親水性,可以改善多肽整體的親疏水性質,小分子PEG可以做為Link,把修飾基團和多肽結合起來,有時候要比6-氨基己酸更有優勢。常見的是Biotin-PEG4-Peptide。
PEG4的結構如下:
接下來,我將詳細介紹下多肽的PEG修飾。
小分子PEG修飾。分子量區間在PEG2-PEG24之間。如
AEA ? 5-amino-3-oxapentanoic acid
AEEA 8-Amino-3,6-Dioxaoctanoic Acid? 9 atoms (mini-PEG)
TTDS 1,13-diamino-4,7,10-trioxatridecan-succinamic acid
Ebes ? 8 - amino - 3,6 - dioxa - octyl)succinamic acid (PEG2-Suc-OH)?
AEEEA ? 11-Amino-3,6,9-Trioxaundecanoic Acid? 11 atoms(mini-PEG3)
dPEG(4) ? 15-amino-4,7,10,13-tetraoxa-pentadecanoic acid
dPEG(8) ? alpha-amino-omega-carboxy octa(ethylene glycol)
dPEG(12) ? alpha-amino-omega-carboxy dodeca(ethylene glycol)
這類小分子PEG就相當於特殊的氨基酸,修飾步驟和合成氨基酸的步驟壹樣。
例如我們在多肽中插入AEEA,
那麽所使用的原料壹般為Fmoc-AEEA-OH,(CAS:166108-71-0)
大分子PEG的修飾,分子量區間在PEG500-PEG40K之間。例如PEG2000和PEG5000的修飾。具體以PEG2000為例。
常見的PEG2000的修飾位點為
1:多肽的N端,如PEG2000-DTGLIWAPQNT-OH。
2:氨基酸Lys的側鏈H2N-DTGLIW-K(PEG2000)-APQNT-OH
3:Cys的側鏈,如H2N-Cys(Mal-PEG2000)-DTGLIWAPQNT-OH,通過巰基和Mal結合來把PEG2000修飾在多肽上。
特殊的PEG2000修飾位點
1:在多肽中間,如H2N-DTGLIW-PEG2000-APQNT-OH,因為通過固相合成,PEG2000很難連接到H2N-APQNT-Resin上,我們之前做過大量固相合成實驗,反應速率慢,收率低,使用PEG2000原料也比較多,所以通常我們采用液相分段合成,這樣可以節約很多的PEG2000原料。是個產品在市場上更有優勢。
2: 在多肽C端,如H2N-DTGLIWAPQNT-PEG2000,這個比在中間的要簡單很多。
PEG2000其實是壹個混合物,因為其n值在壹個範圍內,例如n=40、41、42…45…46、47等。我們可以通過下面Tof圖譜看出PEG2000的峰型,是壹簇比較集中的峰。