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定制多肽的PEG修飾有哪個方面

生物學角度來說;作為藥物先導化合物的多肽分子在體內的應用受到壹定程度的限制,主要體現在生物體腎小球的過濾作用、體內蛋白酶的水解破壞作用以及因多肽分子引起的體內抗原反應。將多肽用PEG修飾後(Pegylation),上述三方面的限制均大幅減小,從而提高了多肽在生物體內的應用。

物理化學性質角度;因為PEG的親水性,可以改善多肽整體的親疏水性質,小分子PEG可以做為Link,把修飾基團和多肽結合起來,有時候要比6-氨基己酸更有優勢。常見的是Biotin-PEG4-Peptide。

PEG4的結構如下:

接下來,我將詳細介紹下多肽的PEG修飾。

小分子PEG修飾。分子量區間在PEG2-PEG24之間。如

AEA ? 5-amino-3-oxapentanoic acid

AEEA 8-Amino-3,6-Dioxaoctanoic Acid? 9 atoms (mini-PEG)

TTDS 1,13-diamino-4,7,10-trioxatridecan-succinamic acid

Ebes ? 8 - amino - 3,6 - dioxa - octyl)succinamic acid (PEG2-Suc-OH)?

AEEEA ? 11-Amino-3,6,9-Trioxaundecanoic Acid? 11 atoms(mini-PEG3)

dPEG(4) ? 15-amino-4,7,10,13-tetraoxa-pentadecanoic acid

dPEG(8) ? alpha-amino-omega-carboxy octa(ethylene glycol)

dPEG(12) ? alpha-amino-omega-carboxy dodeca(ethylene glycol)

這類小分子PEG就相當於特殊的氨基酸,修飾步驟和合成氨基酸的步驟壹樣。

例如我們在多肽中插入AEEA,

那麽所使用的原料壹般為Fmoc-AEEA-OH,(CAS:166108-71-0)

大分子PEG的修飾,分子量區間在PEG500-PEG40K之間。例如PEG2000和PEG5000的修飾。具體以PEG2000為例。

常見的PEG2000的修飾位點為

1:多肽的N端,如PEG2000-DTGLIWAPQNT-OH。

2:氨基酸Lys的側鏈H2N-DTGLIW-K(PEG2000)-APQNT-OH

3:Cys的側鏈,如H2N-Cys(Mal-PEG2000)-DTGLIWAPQNT-OH,通過巰基和Mal結合來把PEG2000修飾在多肽上。

特殊的PEG2000修飾位點

1:在多肽中間,如H2N-DTGLIW-PEG2000-APQNT-OH,因為通過固相合成,PEG2000很難連接到H2N-APQNT-Resin上,我們之前做過大量固相合成實驗,反應速率慢,收率低,使用PEG2000原料也比較多,所以通常我們采用液相分段合成,這樣可以節約很多的PEG2000原料。是個產品在市場上更有優勢。

2: 在多肽C端,如H2N-DTGLIWAPQNT-PEG2000,這個比在中間的要簡單很多。

PEG2000其實是壹個混合物,因為其n值在壹個範圍內,例如n=40、41、42…45…46、47等。我們可以通過下面Tof圖譜看出PEG2000的峰型,是壹簇比較集中的峰。