異硫氰酸酯和氨基的反應機理

反應機理是循環。N末端氨基酸殘基被異硫氰酸苯酯修飾，然後從多肽鏈上切下修飾的殘基，再經層析鑒定，余下的多肽鏈（少了壹個殘基）被回收再進行下壹輪降解循環。用異硫氰酸苯酯（PITC）與待分析多肽的N-端氨基在堿性條件下反應，生成苯氨基硫代甲酰胺（PTC）的衍生物，然後用酸處理，關環，肽鏈N-端被選擇性地切斷，得到N-端氨基酸殘基的噻唑啉酮苯胺衍生物。接著用有機溶劑將該衍生物萃取出來，酸作用下，該衍生物不穩定，會繼續反應，形成壹個穩定的苯基乙內酰硫脲（PTH）衍生物。