1、與其他氨基糖苷類或卷曲黴素同時全身應用時，可能增加耳毒性、腎毒性和神經肌肉阻滯作用；可能發生聽力減退，甚至停藥後仍可繼續進展至耳聾，往往呈永久性。
2、與神經肌肉阻滯藥同時應用，可能增加神經肌肉阻滯作用，導致骨骼肌軟弱及呼吸抑制或麻痹（呼吸暫停)。
3、與順鉑、依他尼酸註射液、呋塞米註射液或萬古黴素同時全身應用，可能發生聽力損害並在停藥後仍可能繼續進展至耳聾，往往呈永久性。
4、口服避孕藥（含雌激素）與口服新黴素長期合用可能導致避孕失敗，並增加出血的發生率。
5、口服新黴素可影響洋地黃苷類、維生素A或維生素Bl2的吸收，使療效降低；因此應嚴密觀察患者對洋地黃類藥物的療效是否發生改變。口服新黴素的患者，尤其與秋水仙堿及維生素A合用時，其維生素Bl2的需要量可能增加。
6、與多粘菌素類同時全身應用，可能增加腎毒性及神經肌肉阻滯作用。
制劑按新黴素計。硫酸新黴素片(1)0.1g(10萬單位）（2)0.25g(25萬單位）口服，壹次1g，壹日3-4次。兒童，壹次5-10mg/kg，壹日4次。