化學發光免疫分析法根據標記物的種類和發光原理的不同,主要可以分為以下三類:
1. 化學發光免疫分析法(CLIA)
特點:
也被稱為直接化學發光分析法或非酶促化學發光免疫分析法。
該方法利用化學發光試劑(如魯米諾類與吖啶酯類)直接標記抗原或抗體。
發光試劑在發光過程中會消耗標記物,導致發光時間較短,屬於閃光型發光,因此通常只能進行壹次測量,且重復性較差。
應用:
由於其高靈敏度和特異性,廣泛應用於各種抗原、抗體、激素等物質的檢測。
2. 化學發光酶免疫分析法(CLEIA)
特點:
從標記免疫分析的角度看,CLEIA應屬於酶免疫分析,但其酶反應的底物是發光劑。
操作步驟包括首先用酶對生物活性物質進行標記,然後進行免疫反應產生復合物,復合物上的酶再作用於發光底物,最後通過測定發光信號來進行定性或定量分析。
應用:
常用於提高發光信號的強度和穩定性,從而提高檢測的靈敏度。
3. 電化學發光免疫分析法(ECLIA)
特點:
以電化學發光劑(如三聯吡啶釕)作為示蹤物質標記抗原或抗體。
采用納米微球為固相載體的分離方式,以三丙胺作為電子供體。
通過電場作用誘導結合標記物發光,發光強度與被測物質的濃度呈線性關系,從而實現超微量物質的定量分析。