檢驗校正曲線的線性通常采用方法:
(1)線性檢驗:即檢驗校準曲線的精密度。對於以4~6個濃度單位所獲得的測量信號值繪制的校準曲線,分光光度法壹般要求其相關系數|r|≥0.9990,否則應找出原因並加以糾正,重新繪制合格的校準曲線。
(2)截距檢驗:即檢驗校準曲線的準確度,在線性檢驗合格的基礎上,對其進行線性回歸,得出回歸方程y=a+bx,然後將所得截距a與0作t檢驗,當取95%置信水平,經檢驗無顯著性差異時,a可做0處理,方程簡化為y=bx,移項得x=y/b。
建立原則
校正曲線建立得好壞,直接影響測定結果的準確性。正確地建立校正曲線應遵循以下基本原則:
①從減小校正曲線的置信區間考慮,用4~6個實驗點建立校正曲線比較合適,實驗點要均勻分布。
②在校正曲線的線性範圍內,要盡量擴大濃度的取值範圍,且被測組分含量要位於校正曲線中間。
③在總實驗工作量壹定時,適當增加實驗點數目,減少實驗點重復測量次數是有利的;增加每個實驗點的重復測定次數只能提高個別實驗點的測定精密度,而增加實驗點數目能增加校正曲線的穩定性。