質粒構建讓公司合成壹段基因和自己pcr擴增連接結果壹樣嗎

質粒構建讓公司合成壹段基因和自己pcr擴增連接結果不壹樣。

對未知序列進行測序，可以通過PCR把整段基因都擴增出來，但是因為現在測序的技術限制，DNA片段兩端的序列是測不出來的，直接PCR產物測序的結果只能獲得基因中間部分序列。

所以利用細菌的T載體進行TA克隆，把基因整合到質粒上擴增，然後用質粒上的引物再PCR，讓整個目的基因成為新壹輪PCR產物的中間部分，這樣再測序就能夠獲得整個目的的全長序列。

另外，PCR擴增平均每1000個堿基就有兩個錯誤，保真性遠不及菌體內復制。