是夜間活動的。它們主要是吃葉子的，但亦會吃細小的哺乳動物，如家鼠。在很多澳大利亞的棲息地中，案樹會占它們食物的大部份，但卻並非主要部份。這可能是因在案樹葉中含有單寧酸或其他保護性的化學物質。在人類生活的環境中，它們是著名的搶掠者，專向果樹、蔬菜園及廚房埋手。刷尾負鼠是晚間出沒的。
在日間，刷尾負鼠會在樹上的巢或其他方便的地方（如天花的空間）睡覺。雖然它們主要是在樹上生活的，但亦會有很多時間在地上出沒。它們是可以站立的。
雄性刷尾負鼠會發出非常大的嘶叫來保護領土。它們亦會有其他的發聲，主要都是喀嚓聲。大部份刷尾負鼠都相對寂靜。它們壹般都是獨自生活，或以細小群族聚居。刷尾負鼠是有高度的區域性，對外來的動物或負鼠本身都帶有攻擊性。