1、取材 新鮮的小型脊椎動物，如魚、蛙等，長度在10～20厘米，以活體為好。
2、固定。材料洗幹凈。如果是魚，應該先去鱗，再洗凈。然後，放入95％乙醇中固定1～2天。如果材料已經用5～10％甲醛液保存過，則要用清水漂洗後再浸在95％乙醇中，使它充分固定。
3、去皮 用解剖器剝去小動物的外皮。
4、脫脂。把去皮後的標本用繩縛在玻璃片上，整理好姿勢，浸在3%重鉻酸鉀溶液中幾天，除去材料表面的臟物和脂肪粒塊。當溶液變混濁時，更換新液，直到溶液不混濁為止。取出標本，用清水洗幹凈，再浸入95%乙醇中脫脂壹周左右。
5、透明 標本轉入20%氫氧化鉀溶液中。壹周左右，見肌肉呈半透明狀態，裏面骨骼隱約可見，即終止透明。
6、染色 把透明後的標本浸入0.01%茜素紅染液中2～3天，到骨骼染上紅色為止。