按層析原理分類層析主要可以分為以下幾類:
1、吸附層析
這種層析的原理是利用吸附劑的吸附作用,根據吸附劑與被吸附物之間的相互作用力不同進行分離。常見的吸附劑包括矽膠、氧化鋁、活性炭等。
2、分配層析
分配層析是利用不同物質在固定相和流動相之間的分配系數不同進行分離。常見的固定相包括矽膠、纖維素等,流動相則通常為有機溶劑或緩沖液等。
3、凝膠過濾層析
凝膠過濾層析的原理是利用凝膠顆粒的孔徑大小不同進行分離。根據孔徑大小的不同,小分子可以通過凝膠顆粒,而大分子則被阻隔在外圍,從而實現分離。
4、離子交換層分析
離子交換層析是利用離子交換劑與溶液中的離子之間的相互作用力不同進行分離。常見的離子交換劑包括磺酸型離子交換樹脂、羧酸型離子交換樹脂等。
5、親和層析
親和層析是利用生物分子之間的特異性親和力進行分離。常見的親和層析包括免疫親和層析、凝集素親和層析等。
層析的介紹
1、概念
層析法是利用不同物質理化性質的差異而建立起來的技術。所有的層析系統都由兩個相組成:壹是固定相,另壹是流動相。
當待分離的混合物隨流動相通過固定相時,由於各組分的理化性質存在差異,與兩相發生相互作用(吸附、溶解、結合等)的能力不同,在兩相中的分配(含量比)不同,且隨流動相向前移動,各組分不斷地在兩相中進行再分配。
分部收集流出液,可得到樣品中所含的各單壹組分,從而達到將各組分分離的目的。
2、特點
各種薄層層析的原理與其對應的柱層析原理相同,但比其相應的柱層析具有更多的優越性。它同柱層析壹樣,可選擇不同的支持劑和不同的處理方法進行薄層層析,它保持了操作方便、設備簡單、顯色容易等特點。
同時,層析速度快,壹般僅需15~20分鐘,混合物易分離,分辨力壹般比紙上層析高10倍,甚至100倍,它既適用於只有0.01微克(壹般用幾十微克)的樣品分離,又能分離大於500毫克的樣品作制備用,而且可以使用如濃硫酸、濃鹽酸之類的腐蝕性顯色劑。